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  • 细胞工程课件
  •   这是细胞工程课件,包括了细胞工程的基础知识与基本技术;植物组织培养;悬浮细胞培养和次生代谢物生产;花药及单倍体植株培养;原生质体制备与细胞融合;人工种子制备;植物脱病毒技术;动物细胞与组织培养,动物细胞融合,细胞重构与动物克隆,淋巴细胞杂交瘤与单克隆抗体,染色体转移与基因转移,人类干细胞研究,原核细胞的原生质体融合,真菌细胞的原生质体融合等内容,欢迎点击下载。

      ? Skoog和崔澄发现腺嘌呤等能芽生成,指出腺嘌呤与生长素之比,比例高则生芽,比例低则生根;

      全世界通过植物细胞培养再生成植株已超过600种,已使许多具有重要经济价值的果树、药材、蔬菜和花卉等实现商品化生产。

      纯酒精浸10 min,无菌水洗净,次氯酸钙(10%)浸20~30 min,无菌水洗3~5次,无菌滤纸吸干; ;

      自来水洗净,纯酒精漂洗,升汞(0.1%)浸1min,或次氯酸钠(2%)浸15~20min,无菌水反复冲洗,无菌滤纸吸干;

      生长素与细胞素对于细胞生长与分化具有协同作用,它们的量以及比例的不同配合,对细胞分化起着重要的作用;

      外植体本身内源激素水平的差异,导致它们分化时对培养基中所添加的这两种激素量及其比例反应不尽相同;

      1956年,Routier & Nickell首先提出把植物细胞当作工业合成天然产物的途径;

      2006年2月,美国Dow AgroSciences公司完成了世界上第一个注册的植物制造疫苗;

      将病原菌抗原决定基因转入植物基因组中,利用植物细胞而不是整株植物在一个安全的室内中生产疫苗,以激活人体的免疫能力。在制造过程中完全不含有任何动物成份。

      细胞固定化有利于在细胞团间和细胞团内形成化学物质和各种物理因素的梯度,这是高产次生代谢物的关键;

      将细胞包埋在凝胶载体的微小空格内或包埋于半透性聚合物的超滤膜内,它又分为凝胶包埋法和微胶囊法。

      微胶囊法是利用天然的或合成的高材料作为微囊壁材,包裹成微小球囊,培养基成分和代谢产物等小物质可以通过,细胞不能通过,使囊内成为一个微小。

      双醋酸荧光素(FDA)染色法:FDA进入细胞,被脂酶分解产生有荧光的极性荧光素;FDA不能进入死细胞;

      原生质体置液体培养基中培养,不时轻摇,能较快生长。细胞团形成后应移到固体培养基中才能继续生长或分化成苗。

      两个微电极尖端分别与两个靠近的原生质体表面接触,用5~12 A的电流刺激1~5毫秒,促成融合。

      相距200 m的微电极插入原生质体溶液中,先通入交变电场,使其紧密接触成串珠状;再施以适当电脉冲,原生质体接触区发生可逆击穿而融合;

      细胞系 (Cell line) 原代培养物经首次传代成功后的细胞培养物,包括:有限细胞系和连续细胞系; 细胞株 (Cell strain) 通过选择或克隆从原代培养物或细胞系中获得的具有特定性质或标志的培养物;

      中科院水生所朱作言院士发表在2005年3月美国《繁殖生物学》上的文章“细胞质对来源于转基因鲤鱼的细胞核与金鱼去核卵配合的属间克隆鱼发育的影响”报道:

      以长激素基因鲤鱼的胚胎细胞核为供体,以金鱼去核未受精卵为受体,进行属间克隆,在总共501枚操作卵中,得到7尾正常发育为成体鱼的属间克隆鱼。克隆鱼的外形特征酷似细胞核供体鲤鱼而不同于受体金鱼,PCR检测和总DNA的RAPD比较分析均克隆鱼的核基因组DNA来源于供体鲤鱼;

      在血液循环期以前的克隆胚胎存着来源于供体和受体两种类型的线粒体DNA,在其后续发育阶段的克隆胚胎直至克隆鱼个体中,仅存在受体细胞质的线尾个体的脊椎骨数量是31个,而通常鲤的脊椎骨数量是33~36个,金鱼的脊椎骨数量是26~28个。

      1.从多塞特母绵羊的乳腺中取出乳腺细胞,将其放入低浓度的营养培养液中,细胞逐渐停止了,此细胞称之为供体细胞;

      2. 从一头苏格兰黑面母绵羊的卵巢中取出未受精的卵细胞,并立即将其细胞核除去,留下一个无核的卵细胞,此细胞称之为受体细胞;

      3. 利用电脉冲的方法,使供体细胞和受体细胞发生融合,最后形成了融合细胞,由于电脉冲还可以产生类似于自然受精过程中的一系列反应,使融合细胞也能象受精卵一样进行细胞、分化,从而形成胚胎细胞; 进行早期胚胎发育;

      4. 将早期胚胎转移到苏格兰黑面母绵羊的子宫内,胚胎细胞进一步分化和发育,最后形成一只小绵羊。

      2003年8月6日意大利科学家宣布以自体克隆的方式克隆出一只小母马;小母马的“妈妈”也是其“姐姐”,也是“自己”。

      2003年10月我国山东莱阳农学院克隆牛“双双”经人工授精,产下“健健”,证明克隆牛具正常生殖能力;

      2004年1月21日在新疆乌鲁木齐县六十户乡降生中国首例异种克隆动物克隆北山羊。

      将北山羊的体细胞与山羊的卵母细胞结合组成新的胚胎,待胚胎发育到一定阶段移植到发情的母山羊体内。克隆北山羊,雌性,出生重为2.32公斤,体长42厘米,体高35厘米。

      世界首例成年体细胞克隆水牛2005年3月17日在广西大学“863计划”良种牛南方繁殖中心诞生

      这次研究制造的1095个胚胎只有三个成功受孕,其中一个流产,另一只小狗出生22天后因肺炎死亡,只有史纳比(snuppy )仍然,成功率只有0.09%

      英国2004年8月向纽卡斯尔大学颁发了世界上第一份克隆人类胚胎的执照,批准这所大学进行以医疗为目的的克隆人类胚胎研究。

      干细胞是动物(包括人)胚胎及某些器官中具有复制和多向分化潜能的原始细胞,是重建、修复病损或衰老组织、器官功能的理想种子细胞。

      即受精卵及胚胎干细胞,是最原始的干细胞,具有更新、高度增殖和多向分化发育成为人体全部206种组织和细胞甚至形成完整个体的分化潜能。当受精卵发育成囊胚时,内层细胞团的细胞即为胚胎干细胞。

      这是本研究最重要的第一步。可以从动物或人的早期胚胎或各器官、组织中分离并经鉴定,且能在体外长期保持干细胞特性(一般应稳定传25代以上);

      2003年9月美国克隆专家扎沃斯将人类的DNA与一头母牛的卵细胞结合后,克隆出“人牛胚胎”,已存活了两星期。(不鼓励)

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